| 背景 |--------------
腦膠質瘤是最常見的原發(fā)性顱內腫瘤,國內外有關膠質瘤的臨床治療效果在近30年內沒有明顯改進。建立有效的惡性腦膠質瘤診療體系很大程度上依賴于腦膠質瘤基礎研究和臨床技術水平的全面提高。然而膠質瘤基礎研究的實現(xiàn)必然依賴于一流的神經腫瘤實驗室。華山神經外科免疫實驗室在此背景下規(guī)劃,并在周良輔院士和毛穎院長領導下啟動,該實驗室的啟動還受到了腫瘤科國家重點??瀑Y助。
目前實驗室總面積約30m2,由兩個房間構建,分別為細胞房、熒光顯微鏡室和公共實驗區(qū)組成。細胞房、熒光顯微鏡室放一間,另外一間是公共實驗區(qū)。
公共實驗區(qū)面積20平方米,包括超速低溫離心機、臺式高速低溫離心機和常溫高速離心機、液氮罐、以及公共儀器。公共儀器包括熒光定量PCR儀、普通PCR儀、分光光度計、凝膠成像分析儀、多功能酶標儀、紫外分光光度計等大型公用儀器。細胞培養(yǎng)室面積10平方米,包括培養(yǎng)箱、超凈臺、移液器、抽濾器等。熒光顯微鏡室包括熒光顯微鏡,以及配對的電腦。
在神經免疫實驗室可以進行常規(guī)的實驗操作,包括載體的克隆和構建、細胞培養(yǎng)和基因轉染、核酸與蛋白的提取和分子雜交、組織病理學分析、定量PCR 檢查、ChIP-PCR、流式分析等諸項實驗。主要功能是神經外科研究生從事腫瘤研究的基礎實驗。此外還包括一部分簡單的膠質瘤檢測臨床服務,包括分子病理和未來的DC細胞及免疫細胞培養(yǎng),逐漸過渡到GMP實驗室標準。
擬開展的具體實驗:
一、流式細胞術
應用:
1) 淋巴細胞亞群的測定:
2) 基礎方面可以進行細胞周期、凋亡、細胞因子及各種免疫熒光的檢測及相關實驗;提供試劑。
3) 腫瘤干細胞流式細胞儀測定(CD133、A2B5)
4) T細胞亞群 Th1.Th2 細胞檢測(流式法)
二:RT-PCR
應用:常規(guī)的基因表達的檢測
三: Western Blot
應用:常規(guī)蛋白表達的檢測
四:神經病理
應用:為科研、臨床和教學提供組織包埋、病理切片、HE染色、原位雜交、免疫組化、冰凍切片、電鏡標本包埋、臨床診斷服務。并開展部分收費項目,為膠質瘤的特提化治療提供分子診斷基礎。
擬研究的方向:
1、膠質瘤微環(huán)境與再改造治療
2、膠質瘤與代謝
3、膠質瘤分子病理與靶向治療
4、膠質瘤分子網絡與耐放化療
5、膠質瘤免疫與免疫治療
6、膠質瘤的表觀遺傳學